实验室用小型发酵罐，发酵现象演示实验需要什么仪器与材料

虽然我很聪明，但这么说真的难到我了

发酵罐啊。。。这是必须的。实验室可以用专门的小罐。原料方面就看你要什么产物了。如果周期短一点，就去制谷氨酸什么的，三十个小时左右的样子吧。如果周期不介意长一点就可以制酒啦。仅仅是发酵过程的话原料不需要像工业生产那样从头开始，完全可以用中间物开始。省掉一些步骤。

发酵罐扩大培养原理是进行液体发酵。生产上使用的发酵罐容积大，均用钢板或不锈钢板制成。供实验室使用的小型发酵罐，其容积可从约1升至数百升或大些。10升以下是用耐压玻璃制作罐体，10升以上用不锈钢板或钢板制作罐体。发酵罐配备有控制器和各种电极，能自动地调控试验所需要的培养条件，是微生物学、发酵工程、医药工业等科学研究所必需的设备。

这个要考虑到你的需求和你的预算，不知道你所需要的是多大体积的罐子，实验室如果小试的话，也存在从5L到50L的大小，所以最好还是确定型号。如果是在学校实验室或者研究所的话，可以考虑用进口的一些发酵罐，比如美国NBS的罐子，无论从性能和稳定性来说，基本上都是不错的选择，缺点就是价格偏高，10L的罐子，差不多价格在20w以上。如果是工厂在做一些小试的话，可以考虑用国产的，无论是玻璃罐子或者不锈钢罐子，价格都不会很高，价格在10w以内。

不好意思，我不是搞发酵的，只是实验室有人研究发酵才略懂一二的，我们实验室是用小发酵罐（1L好像是）模拟培养，是要富集发酵产物的，可以随时调节pH。要是用摇床应该是不流动的，就是营养不会得到补充，我个人认为最好还是用生产类似的发酵罐进行培养比较靠近生产的数值。

摇床培养是要加入空气吧，乳酸菌据我所知应该是兼性厌氧的比较多，所以有空气的话应该不会影响生长，好像还会长的更好，如果你想得到的产物是菌体的话就还好，要是想要得到发酵副产物的话就应该采取厌氧，可以充氮气摇床培养。

总过滤器灭菌时，一定要保证蒸汽的压力，使用压力一定要在0.3~0.4 MPa之间，灭菌过程中过滤器的表压应在0.15~0.20 MPa左右。中小型过滤器一般保压45~60 min，总过滤器（一级过滤器）保压时间为1.5~2 h。对于新装介质的过滤器，灭菌时间应适当延长一些，一般延长15~20 min。灭菌后要用压缩空气将介质吹干，吹干时间可根据介质的吸水性质和过滤器的规模而定。玻璃纤维吹干时间略短，棉花介质稍长，中小型过滤器吹干时间在1~2 h，大型过滤器可达2~4 h。用压缩空气吹时，气流要适当，太小吹不干，过大容易将介质顶翻，造成空气走短路而带菌。

我们公司专门做试验用的小型发酵装置。上月曾给北京中关村二村科学工程研究所做了一套小型的试验装置。大体思路就是使发酵料在一个人为设定的环境中进行发酵。本装置要求不锈钢材质，最好达到自动化控制这样对温度和湿度的控制更为精确。另外发酵不可能是单一一种物质发酵，所以发酵罐入口拥有类似于绞龙的装置把发酵料搅拌均匀。加热可以采取小型电加热带，缠在发酵罐外部用晶闸管进行温控。补水就很容易解决了你不妨多想想。

你好！hehe`~超市买酵母粉，然后你用水和点面。放在温度较高的地方，冬天的话比如暖气这些半天就可以了。这个就是最简单的发酵试验了。北方人的蒸馒头，对于面都要发酵一下的。如有疑问，请追问。

你的发酵罐是用什么样的灭菌方法？蒸汽原位灭菌（有蒸汽发生器）？不是的话，直接把罐放到灭菌锅里去灭！下面是蒸汽原位灭菌的流程： 灭菌要进行空消和实消两步。空消是在投料前，对气路、料路、种子罐、发酵罐用蒸汽进行灭菌，消除所有死角的杂菌，保证系统处于无菌状态。实消是当罐内加入培养基后，用蒸汽对培养基进行灭菌的过程，种子罐和发酵罐实消的操作过程相同。 空消过程中，维持蒸汽温度121℃左右，先开排污水阀和进气阀，排空夹套水，在对管路、滤器和种子罐发酵罐灭菌，空消时间大约为30到40分钟，当设备初次使用或者长期不用的情况下，最好采用间歇灭菌的方法，间歇灭菌指第一次空消结束后，间隔3到5个小时再空消一次，以便杀死芽孢。除菌过滤器的滤芯不能承受高温高压，因此，蒸汽减压阀必须调整在0.13Mpa，不得超过0.15MPa。空消时，应将罐上的接种口、排气阀及料路阀门微微打开，使蒸汽通过这些阀门排出，同时保持罐压为0.13～0.15Mpa。空消结束后，应将罐内冷凝水排掉，并将排空阀门打开，防止冷却后罐内产生负压、损坏设备。空消时，溶氧、PH 电极取出，可以延长其使用寿命。 空消结束后，应尽快将配好的培养基从加料口加入罐内，此时夹套内应无冷却水。培养基在进罐之前，应先糊化，一般培养基的配方量以罐体全容积的70%左右计算(泡沫多的培养基为65% 左右，泡沫少的培养基可达75%～80%)，考虑到冷凝水和接种量因素，加水量为罐体全容积的50% 左右，加水量的多少与培养基温度和蒸汽压力等因素有关，需在实践中摸索。先开启机械搅拌装置，使罐内物料均匀混合，转速50～100rpm。打开夹套蒸汽阀、排汽阀，对罐内培养基预热，当罐内温度升到90℃时，关闭夹套进汽阀，打开罐内所有进汽阀，通入蒸汽。当罐温上升到105℃时，缓缓打开排汽阀，将罐顶冷空气排掉，持续五分钟后，关闭排汽阀。当罐压升至0.12Mpa，温度升到121～123℃时，控制蒸汽阀门开度，保持罐压不变，30 分钟后停止供汽。打开冷却水的进排阀门，在夹套内通水冷却，当罐内压力降至0.05Mpa 时，微微开启排气阀和进气阀，进行通气搅拌，加速冷却速度，并保持罐压为0.05Mpa，直到罐温降至接种温度。

应该是发酵条件的控制问题。一般认为，发酵罐越小，条件变化越剧烈，也越不容易控制。比如温度、ph值、溶氧等，本身东西少，参数变化就快，就相当于微生物的生长环境总是处于变化之中，当然就不利于发酵的进行了。罐体越大，条件变化就越缓慢，控制起来也越容易。至少，像保持恒定的温度和通风量，就比小罐容易得多。对于微生物来说，生存环境是稳定的，也有利于发酵的进行。

　　1.材料与方法：　　1.1材料：　　1，菌种：大肠杆菌　　2，培养基：?种子培养基（葡萄糖5.0g，蛋白胨5.0g，酵母膏2.5g，牛肉膏5.0，水500ml，pH值7.0），　　?发酵培养基（葡萄糖100g，蛋白胨50g，酵母膏25g，牛肉膏50g，氯化钠25g，氯化铵25g，水5L，pH7.0，　　3，试剂：泡敌，菲林试剂，0.1%的标准葡萄糖溶液，40%氢氧化钠。　　4，仪器设备：BIOTECH-7BGZ发酵罐一套，分光光度计，旋转式摇床，离心机，烘箱等。　　1.2实验原理：　　发酵罐是进行液体发酵的专用设备。实验室使用的小型发酵罐，其体积可从1L至数百升。一般5L一下是用耐压玻璃制作罐体。发酵罐配备控制系统，它主要是对发酵过程中的各种参数如温度，PH，溶解氧，搅拌速度，空气流量，补料，泡沫水平等进行设定，显示，记录以及对这些参数进行反馈调节控制。　　大肠杆菌是遗传工程过程中常用的受体菌。通过控制台合适的培养条件，可使大肠杆菌迅速持续地生长，获得所要求的高产培养物。　　为了了解发酵过程中菌体的生长及对培养基的利用情况，需要发酵过程中定时设定地取样测定。包括对细菌进行镜检，测定不同时期发酵液的细菌浊度及残留还原糖的变化。　　1.3实验流程：　　培养24h 培养12h　　菌种 斜面? 一级接种 二级接种　　37℃ 37℃ （500ml摇瓶）　　培养基　　8~10h　　发酵罐 管路准备 实罐灭菌 发酵 放罐　　37℃　　取样 分析测定　　1.4发酵罐剖面图：　　1.5实验具体步骤：　　1.5.1菌种准备　　1,配制培养基　　配制种子固体培养基100mL,分装试管,0.1MPa灭菌20min,然后摆成斜面.　　配制种子培养液600mL,分装50mL于一个250mL三角瓶中(作一级种子瓶),余下550mL平均分装于三个500mL三角瓶中(作二级种子用),同上灭菌.　　2,接种与培养　　上罐前两天,从冰箱中取出菌种转接斜面,37℃培养24h.　　上罐前一天,由斜面菌种转接一级种子瓶, 37℃振荡培养12h,然后转接二级　　种子瓶, 37℃振荡培养10h.　　1.5.2上罐前的准备及实罐灭菌　　1，洗净发酵罐及各联接胶管　　配制发酵培养基5.0L,置发酵罐内,加入几滴泡敌.　　校正pH电极和溶氧(DO)电极.　　把电极插口,取样管,补料口,消泡剂料瓶等固定,密封好后,开夹套出,进水阀V2,W1,使夹套充满水,用保护罩盖住罐盖及发酵罐,用倾倒螺钉锁紧法兰,开保护罩顶部排气阀V4,启动蒸气发生器,启动搅拌马达,调转速300r/min,开启冷凝水出水阀V1,开启蒸气阀门S1,进行在位灭菌；　　2，当保护罩顶部阀门V4有蒸气排出时,2min后关闭阀门,当罐温接近灭菌温度时,微开阀V4适当排气,并调整蒸气阀S1维持罐温.保温结束后,关蒸气阀S1,全开冷凝水出水阀V1,开进水阀W3,将温度设定在37℃,切入自动.当温度降到100℃以下,缓缓开排气阀V4,使保护罩顶压力表指示为零,移去保护罩；　　3，连接通气管路,将进气过滤器K7口与控制台左侧空气出口连通,开弹簧夹,接通空气压缩机电源 , 对 发 酵 罐 进 行 通 气 , 调 整 空 气 流 量 3 ～5L/min.当温度达到37℃时,将预先灭菌的pH电极,DO电极(75%酒精消毒,UV消毒)接入发酵罐,连接各电极导线；　　4，将流加碱的管线与泵和罐体连接,通过面板操作开关选择碱泵,打开手动开关,使胶管内充满液体,将输出上限设在15%,下限设为"0",待一切准备就绪,将"手动"开关调节到"自动"状态.设定搅拌转速为300r/min,空气流量2～3L/min, pH7.0, DO100%,系统进入发酵状态.　　1.5.3发酵操作　　当发酵罐内温度达到并维持在所需温度后,进行如下操作:　　取样:松开弹簧夹J2,用无菌空气将取样管残液压入发酵罐内,再夹紧J2,将出料管放入接料瓶,松开取样管弹簧夹J3,发酵液被压入接料瓶,开J2,J3排出取样管内残料,夹紧J2,J3.　　接种:将酒精棉置于接种口槽中,旋松接种口,点燃酒精棉,在火焰保护下,打开接种口,倒入二级种子,然后旋紧接种盖,移去火焰圈.接种后立即进行第一次取样,用于测定细菌OD值.　　1.5.4发酵过程中的管理　　每小时记录发酵过程温度,pH,DO,通风,转速的测定数值,并记录操作情况.注意发酵罐运转是否正常,检查各控制参数是否在合适的范围内,遇有故障及时排除.每小时取一次样.每次取样50mL.取样时,用量筒准确取流出的培养液50mL, 对号倒入三角瓶中,封口,立即放入二楼冷库中保存.　　1.5.5发酵过程中各理化指标的测定　　取样：样品→振荡均匀→取样5mL→测OD值　　↓　　离心(3000rpm,10min)　　↓　　上清液　　吸光度:将分光光度计开机,选用A600波长,预热20min,用蒸馏水调节零点,将对照样倒入比色杯中,作为空白对照,并对不同样液依次进行测定,对浓度大的菌悬液用对照样(未接种的培养基)适当稀释后测定,使其OD值在0.1～1.0之间,经稀释后测定的OD值要乘以稀释倍数,才是培养液实际的OD值.　　1.5.6放罐　　经过发酵约10h后,菌量增长(OD)值缓慢时,便可放罐.排放液需经灭菌处理才可进入下水道.　　1.5.7清洗　　放罐后,将发酵罐清洗干净,关闭所有电源.